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肝素及低分子量肝素是一類有著悠久歷史的糖類藥物，同時也是目前臨床上依然廣泛應(yīng)用的重要抗凝藥物，其抗凝活性與其分子量分布、寡糖組成、硫酸化位點、硫酸化程度等結(jié)構(gòu)相關(guān)。然而，其結(jié)構(gòu)分析的難度一直是該領(lǐng)域的難點，在此之前的肝素及低分子量肝素完整的結(jié)構(gòu)序列分析方法均有局限，這極大地限制了我們對該產(chǎn)品更深入的了解和應(yīng)用。

Glycomapping軟件應(yīng)用于低分子量肝素糖譜分析示意圖

本論文中提到的“Glycomapping”為張真慶課題組開發(fā)具有自主知識產(chǎn)權(quán)的軟件，該工作首先利用超高效分子排阻色譜（UPSEC）對以低分子量肝素為代表的糖類藥物進(jìn)行分離；在此基礎(chǔ)上利用“Glycomapping”軟件并結(jié)合HPSEC色譜行為穩(wěn)定、可預(yù)測的特點，通過重復(fù)迭代擬合，重構(gòu)多重峰的分離色譜圖，使未分離峰、肩膀峰以及隱藏峰全部達(dá)到基線分離效果；最后“Glycomapping”軟件基于“從頭預(yù)測”策略構(gòu)建的肝素多糖、寡糖理論數(shù)據(jù)庫，利用擬合后不同聚合度寡糖組分的準(zhǔn)確色譜保留時間對質(zhì)譜實驗數(shù)據(jù)與理論數(shù)據(jù)庫的匹配進(jìn)行限制，識別矯正并去除假陽性質(zhì)譜信號，完成質(zhì)譜數(shù)據(jù)的正確歸屬。

“Glycomapping”軟件基于超高效液相-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，可自動化進(jìn)行糖譜分析，實現(xiàn)了低分子量肝素的全組分分離與定性定量分析。該軟件成功實現(xiàn)了依諾肝素鈉、那屈肝素鈣、達(dá)肝素鈉等系列低分子量肝素的糖譜分析；并成功應(yīng)用于不同來源、不同生產(chǎn)工藝的依諾肝素鈉樣品質(zhì)量的一致性評價，為肝素、硫酸軟骨素、硫酸化巖藻聚糖等其他復(fù)雜多糖的結(jié)構(gòu)解析及全組分定性定量分析提供了新的可行策略。同時，該軟件為復(fù)雜多糖的自動結(jié)構(gòu)分析提供了可行策略，具有巨大的商業(yè)化價值，自動結(jié)構(gòu)分析在制藥、食品等行業(yè)中的產(chǎn)品一致性評價上具有非常重要的意義和巨大的潛力，期待這種新的結(jié)構(gòu)分析技術(shù)的應(yīng)用和推廣，大幅提高產(chǎn)品一致性評價的效率和準(zhǔn)確性，為更多新產(chǎn)品的開發(fā)提供結(jié)構(gòu)分析的技術(shù)支持。

相關(guān)論文發(fā)表在Analytical Chemistry上，蘇州大學(xué)碩士研究生閆娜為文章的第一作者，張真慶教授和易琳助理研究員為共同通訊作者。

作者：Na Yan（閆娜）, Feifan Song（宋非凡）, Yilan Ouyang（歐陽藝蘭）, Duxin Li（李篤信）, He Tian（田禾）, Lin Yi*（易琳）, Robert J. Linhardt, Zhenqing Zhang* （張真慶）

第一作者信息：

閆娜，蘇州大學(xué)藥學(xué)院2019級碩士研究生。2019年本科畢業(yè)于蘇州大學(xué)藥學(xué)院中藥學(xué)系。曾榮獲蘇州大學(xué)校級優(yōu)秀研究生、蘇州大學(xué)“協(xié)鑫獎”獎學(xué)金、蘇州大學(xué)“和合”獎學(xué)金、2017 至 2018 學(xué)年度國家獎學(xué)金、蘇州大學(xué)學(xué)業(yè)獎學(xué)金特等獎、百拓&安捷倫杯”生物醫(yī)藥色譜分析技術(shù)全國公開挑戰(zhàn)賽優(yōu)勝獎、蘇州大學(xué)優(yōu)秀畢業(yè)生等。參與發(fā)表SCI論文6篇，其中以第一作者在Analytical Chemistry、Food Chemistry發(fā)表SCI論文兩篇；申請專利6項，授權(quán)5項。

通訊作者信息：

張真慶，蘇州大學(xué)特聘教授，博士研究生導(dǎo)師。獲江蘇省特聘教授、江蘇省特聘教授、江蘇省雙創(chuàng)人才、江蘇省六大高峰人才等榮譽(yù)，現(xiàn)任CDE糖類藥品評審專家，擔(dān)任中國藥學(xué)會藥分委員會專家委員等多項職務(wù)。他從事糖類藥物研究逾20年，在糖類藥物的分析方法學(xué)、質(zhì)量控制、結(jié)構(gòu)解析、活性研究等領(lǐng)域取得豐碩成果。先后發(fā)表SCI論文近百篇，包括Nature Biotech、JACS、PNAS、Anal. Chem等領(lǐng)域頂級期刊；申請專利逾50項，授權(quán)專利近20項；協(xié)助逾十家企業(yè)完成了多個品種肝素類藥物的一致性研究；領(lǐng)銜GV-971結(jié)構(gòu)、工藝、質(zhì)量、體內(nèi)藥動學(xué)等研究助力GV-971的上市。

主要研究方向：肝素類藥物糖組學(xué)研究、糖藥物結(jié)構(gòu)及質(zhì)量控制、糖藥物與免疫、神經(jīng)退行性疾病等構(gòu)效關(guān)系研究。

主頁鏈接：http://pharm.suda.edu.cn/93/a3/c28908a496547/page.htm

易琳，蘇州大學(xué)助理研究員。2014年畢業(yè)于蘇州大學(xué)藥學(xué)院，獲學(xué)士學(xué)位；2020年畢業(yè)于蘇州大學(xué)藥學(xué)院，獲藥物分析學(xué)博士學(xué)位；期間2018年至2020年獲留學(xué)基金委國家公派項目資助，赴美國北卡羅萊納大學(xué)教堂山分校藥學(xué)院聯(lián)合培養(yǎng)；2020年9月進(jìn)入蘇州大學(xué)藥學(xué)院工作。主持國家自然科學(xué)基金、江蘇省“雙創(chuàng)博士”、依諾肝素鈉序列分析及與PF4相互作用研究（橫向）等項目；以第一作者和通訊作者在Analytical chemistry、Carbohydrate Polymers,、Journal of Chromatography A、Journal of the American Society for Mass Spectrometry等本領(lǐng)域權(quán)威期刊發(fā)表SCI論文逾20篇；申請專利10項、授權(quán)專利7項。主要研究方向：糖胺聚糖結(jié)構(gòu)與活性研究、天然多糖序列結(jié)構(gòu)解析及免疫調(diào)節(jié)的構(gòu)效關(guān)系研究。

出版信息：

Anal. Chem. 2022,94, 38, 13000 

Publication Date: September 14, 2022

https://doi.org/10.1021/acs.analchem.2c01579

Copyright ? 2022 American Chemical Society