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與常規(guī)毫秒級碰撞誘導(dǎo)質(zhì)譜解離（CID）相比，5ns單脈沖193nm紫外激光解離（UVPD）可直接激發(fā)非變性蛋白質(zhì)骨架共價鍵至高能態(tài)引發(fā)高效解離，激發(fā)解離速率提升6個數(shù)量級，位點解離效率和碎片離子產(chǎn)率與其局部非共價作用和微觀結(jié)構(gòu)密切相關(guān)，通過碎片離子和解離產(chǎn)率分析可同時獲得蛋白質(zhì)序列和結(jié)構(gòu)信息。目前，193nm紫外激光解離質(zhì)譜尚未商品化設(shè)備，僅在少數(shù)實驗室有自主搭建設(shè)備。

免疫共受體CD28是癌癥免疫治療的重要靶點，其胞質(zhì)端酪氨酸磷酸化激活引起的下游蛋白識別結(jié)合機制尚不清楚。本工作中，研究人員采用光親和質(zhì)譜法發(fā)現(xiàn)CD28磷酸化胞質(zhì)端與激酶PKCθ的C2結(jié)構(gòu)域特異性結(jié)合；利用193nm紫外激光解離質(zhì)譜對C2結(jié)合前后進行了全序列覆蓋位點光解離效率的差異分析，發(fā)現(xiàn)了光解離效率顯著下降的三個關(guān)鍵結(jié)合區(qū)域和核心識別位點K49、H63、R68；證明了高能紫外激光解離策略在蛋白質(zhì)動態(tài)識別結(jié)構(gòu)變化分析中的高靈敏度和單位點分辨高精度優(yōu)勢。

中科院大連化物所王方軍和肖春雷研究員通過交叉學(xué)科聯(lián)合攻關(guān)，在大連相干光源搭建了193nm紫外激光解離-高分辨質(zhì)譜裝置，在前期工作中通過高能光子對多肽分子的高效激發(fā)解離實現(xiàn)了多磷酸化肽修飾位點精確定位（Chin. Chem. Lett.，2018）和蛋白質(zhì)組學(xué)規(guī)?；蛄需b定（Anal. Chim. Acta.，2021）。

文章鏈接：https://doi.org/10.1016/j.chembiol.2022.01.005

參考資料：http://www.dicp.cas.cn/xwdt/kyjz/202207/t20220711_6475056.html